细胞过于拥挤，影响实验效果！高转化效率虽好，但过高的细胞浓度就像地铁春运，细胞们紧贴在一起甚至难以呼吸。无论是感受态太优秀、质粒过多，还是热激时间过长，都会导致细胞数量超标。

涂布手法失误，可能导致实验失败！如果涂布棒未彻底灭菌或施力过猛，菌液会被“涂抹”成菌泥，甚至可能掺入杂菌，引发问题。

培养基的质量不达标，可能造成更大困扰！当琼脂不够时，培养基会变得过于松软，细胞容易“糊成一团”；营养不均衡也可能导致细胞疯狂生长，失去控制。

环境条件过于苛刻，细胞生长受到影响！温度只要超过37℃一度，细胞的代谢就会迅速提升；而若培养时间过长，菌落可能会重叠成堆。

想要迅速解决这些问题，变糊板为艺术品只需3步急救术！✨

步骤1：稀释！稀释！稀释！

重要的事情要说三遍！取100μL菌液，加入900μL无菌生理盐水，先进行10倍稀释试试效果。如果依然不理想，可以继续进行100倍、1000倍的稀释，直至菌落分布如满天星辰。⚠️小提示：对高转化效率的电转或超感受态，直接从1000倍开始！

步骤2：涂布技巧！

首先，使用酒精灯将涂布棒烧红后冷却10秒，再以“Z”字形轻柔涂抹，宛如给蛋糕抹奶油！如果涂抹面积不够，可以直接更换大皿，让细胞有更宽广的空间。⚠️小提示：涂完后静置10分钟再放入培养箱，以减少菌液的流动。

步骤3：培养基的配制！

琼脂称量需精准到0.1g，灭菌后轻轻摇匀以防分层。培养箱的温度要用温度计进行实测（别只信显示屏！），并在12-18小时内监控，避免细胞过度生长。

场景应对：

如果菌落过于密集但又不想稀释，直接用牙签蘸取菌液，在新板上划出“之”字形，单个菌落轻松获取✅。如果时间紧迫，可以将稀释好的菌液滴5μL在板边，自然扩散成“菌环”，拍照效果绝美。通过尊龙凯时的指导，掌握这些实验技巧，让您的生物医疗研究更加高效、精准！