在坏死性血管炎和肾小球肾炎患者中，常可检测到针对蛋白酶3（PR3）或髓过氧化物酶（MPO）的抗中性粒细胞细胞浆自身抗体（ANCA）。ANCA与中性粒细胞上的靶抗原结合并激活中性粒细胞，这个过程被认为是引发血管炎症和坏死的关键机制。与MPO相比，PR3的ANCA相互作用更为复杂，主要是由于中性粒细胞特异性CD177受体的参与，这影响了PR3-ANCA诱导的中性粒细胞激活。

本文重点探讨PR3与C1q在凋亡细胞清除过程中的相互作用及其潜在影响，旨在揭示PR3在自身免疫疾病中的新角色，为相关疾病的治疗提供新的思路和靶点。蛋白酶3（PR3）作为肉芽肿性多血管炎的自身抗原，与抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）密切相关。此外，PR3是一种丝氨酸蛋白酶，其膜表达可增强多种炎症性疾病，例如ANCA相关性血管炎和类风湿性关节炎。

在细胞凋亡过程中，PR3与磷脂酰丝氨酸（PS）共同外化，并通过钙网蛋白（CRT）依赖机制调节凋亡细胞的清除。补体蛋白C1q是细胞清除过程中重要的介质之一。由于PR3和C1q均参与凋亡细胞的清除及免疫反应的调节，并共享某些配体（如CRT和PS），本文研究二者之间可能的相互作用。

研究发现，在表达PR3的凋亡大鼠嗜碱性白血病（RBL）细胞中，C1q的结合显著增加，并通过表面等离子共振技术证实了纯化C1q与PR3之间的直接相互作用。为了更好地理解这种相互作用的功能性后果，检测了表达PR3的RBL细胞系的C1q依赖性吞噬作用，结果表明PR3抑制了C1q对凋亡细胞摄取的增强作用。这些发现为C1q和PR3在凋亡细胞清除中的角色提供了新的见解，并提示在以凋亡细胞清除和炎症消退缺陷为特征的自身免疫疾病中，存在新的潜在治疗途径。

在研究过程中，采用以下方法：1）蛋白与抗体准备：从人血清中纯化C1q，并定量其球状头（gC1q）和胶原样区域（CLF）；制备多种特异性抗体，包括针对人C1q的兔多克隆抗体、针对C1q的鼠单克隆抗体（A201）和针对PR3的鼠单克隆抗体（CLB128）；2）细胞分离、培养与凋亡诱导，分离人中性粒细胞并诱导其生理性凋亡；3）PR3和C1q的免疫标记，以检测两者的结合；4）凋亡细胞的吞噬实验，模拟吞噬过程并使用流式细胞术分析结果；5）表面等离子共振（SPR）光谱分析，研究PR3与C1q之间的相互作用；6）PR3蛋白水解活性检测，对比PR3对不同底物的消化能力。

研究结果显示，C1q与PR3在凋亡中性粒细胞表面存在共定位，且PR3能够影响C1q的功能。通过SPR实验确认，C1q的各个结构均能够与PR3结合，进一步计算得出PR3与C1q结合的亲和力，揭示PR3对凋亡细胞吞噬的影响。此外，PR3并未降解C1q，这表明其可能通过其它机制干扰C1q的功能。

在总结中，PR3与C1q的直接结合和相互作用表明，PR3可能通过影响C1q的功能来调节凋亡细胞的清除。这一发现为理解自身免疫疾病的机制提供了新的视角，未来的研究将继续探索PR3与C1q相互作用的生理和病理意义，以及其在不同自身免疫疾病中的作用差异。

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