尊龙凯时试剂盒仅限于科学研究领域,不可用于医学诊断检测。本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。操作时,首先将预先包被adropin(AD)抗体的微孔板置于加样架中,随后依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。最后,用底物TMB进行显色,在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,最终在酸的作用下变为黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)浓度成正比,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。
试剂盒组成
以下为不同配置下的试剂盒组成:
- 96孔配置:微孔板12孔×8条,标准品03mL*6管,样本稀释液6mL,检测抗体-HRP10mL,20×洗涤缓冲液25mL,底物A6mL,底物B6mL,终止液6mL,封板膜2张,说明书1份,自封袋1个。
- 48孔配置:微孔板12孔×4条,标准品03mL*6管,样本稀释液3mL,检测抗体-HRP5mL,20×洗涤缓冲液15mL,底物A3mL,底物B3mL,终止液3mL,封板膜2张,说明书1份,自封袋1个。
注:标准品(S0-S5)浓度分别为:0、25、50、100、200、400pg/mL。试剂盒请在2-8℃条件下保存,有效期为6个月。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热原与内毒素的试管,避免细胞刺激,收集后于3000转离心10分钟分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒与聚合物。
4. 组织匀浆:以适量生理盐水搅拌组织,3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如无法及时检测样品,请按单次用量分装,并在-20℃冷冻存放,避免反复冻融,解冻时确保样品均匀充分。
自备物品
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头(05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL)
操作步骤与注意事项
1. 从冷藏环境取出的试剂盒需在室温下平衡15-30分钟后使用,未用完的酶标板应密封保存。
2. 洗涤液可能会有结晶,稀释时可加热水中溶解,但对结果无影响。
3. 所有加样步骤请使用加样器,定期校对其准确性,最佳加样时间控制在5分钟内,样本数量多时建议使用排枪加样。
4. 每次测定应进行标准曲线检测,建议做复孔。如样本中待测物质含量过高,应使用样品稀释液适当稀释后测定,计算时记得乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜仅限一次性使用,避免交叉污染。
6. 操作过程中严格按照说明书执行,试验结果判定依赖酶标仪读数。
7. 底物请避免光照保存。
8. 所有样品、洗涤液及废弃物请按传染处理。
9. 不同批次的试剂及组件不得混用。
温馨提示
尊龙凯时提供代测服务,凡购买本公司ELISA试剂盒的客户均可享受免费的代测服务。如需了解更多信息,请咨询销售经理或在线客服。