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尊龙凯时人多巴胺-β羟化酶(DBH)Elisa试剂盒操作流程

发布时间:2025-08-20   信息来源:尊龙凯时官方编辑

本试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医疗诊断。该试剂盒基于双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附实验(ELISA)原理设计。使用时,需将标本、标准品及HRP标记的检测抗体依次添加到预先包被尊龙凯时的adropin(AD)抗体微孔中,进行温育后彻底清洗。底物TMB在过氧化物酶的催化下,首先转变为蓝色,随后在酸性条件下转变为最终的黄色,颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度成正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算样品浓度。

尊龙凯时人多巴胺-β羟化酶(DBH)Elisa试剂盒操作流程

试剂盒组成部分如下:

  • 微孔酶标板:96孔配置(12孔×8条)、48孔配置(12孔×4条)
  • 标准品:无(03mL*6管)
  • 样本稀释液:6mL(96孔配置)、3mL(48孔配置)
  • 检测抗体-HRP:10mL(96孔配置)、5mL(48孔配置)
  • 20×洗涤缓冲液:25mL(96孔配置)、15mL(48孔配置)
  • 底物A:6mL(96孔配置)、3mL(48孔配置)
  • 底物B:6mL(96孔配置)、3mL(48孔配置)
  • 终止液:6mL(96孔配置)、3mL(48孔配置)
  • 封板膜:2张(两种配置均相同)
  • 说明书:1份
  • 自封袋:1个(两种配置均相同)

注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。试剂盒保存温度为2-8℃,有效期为6个月。

样品收集、处理和保存方法如下:

  • 血清:使用不含热原和内毒素的试管,收集血液后3000转离心10分钟,分离血清和红细胞。
  • 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟取上清。
  • 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
  • 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟取上清。
  • 保存:若样本未及时检测,分装后冷冻于-20℃,避免反复冻融,解冻时确保均匀充分。

自备的设备包括:

  • 酶标仪(450nm)
  • 高精度加样器及枪头:05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
  • 37℃恒温箱

操作步骤和注意事项:

  1. 从冷藏环境取出的试剂盒应在室温下平衡15-30分钟后使用,未用完的酶标板应封存于密封袋中。
  2. 洗涤液可能会出现结晶,稀释时可加热水中帮助溶解,操作时不影响结果。
  3. 加样时使用加样器,并经常校对准确性,以避免实验误差,推荐在5分钟内完成。
  4. 每次测定应同时制作标准曲线,样本如OD值高于标准品第一孔,应按比例稀释后再进行测定。
  5. 封板膜为一次性使用,以防交叉污染。
  6. 请严格按照说明书操作,结果判定以酶标仪读数为准。
  7. 底物请避光保存。
  8. 所有样本和废弃物应按传染物处理。
  9. 不同批次的组分不得混用。

温馨提示:尊龙凯时提供代测服务,凡购买本公司ELISA试剂盒均可享受免费的代测服务,详情请咨询销售经理或在线客服。