尊龙凯时推出了一款基于探针法荧光定量PCR原理的检测试剂盒，该产品具有高效的检测能力以及用户友好的操作特点，旨在满足生物医疗领域的需求。

产品特点

本试剂盒的特点包括：

• 即开即用，用户只需提供样品DNA模板，简化了实验流程。
• 引物及其他组成成分经过严格优化，具有高灵敏度，有效提升检测准确性。
• 提供阳性对照，用于区分假阴性样品，确保实验结果的可靠性。
• 设计引物时考虑了中间普雷沃菌DNA序列的高度保守性，具有较强的特异性，避免与其他生物样本的DNA产生交叉反应。
• 不仅可以进行定性检测，还支持定量检测，定量范围可覆盖至少五个数量级。
• 本试剂盒可支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应，提供足够的检测能力。
• 该产品仅供科研使用，确保其在学术研究中的专业性。

使用方法

1. DNA提取（样本制备区）

使用自选方法提取和纯化样品DNA，本试剂盒与市面上大多数核酸提取试剂盒兼容。

2. 稀释标准曲线样品（样本制备区）

由于阳性对照浓度高，稀释操作需在独立区域进行，以避免污染样品或试剂盒的其他成分。

• 标记6个离心管分别为7，6，5，4，3，2。
• 在每个管中添加45μL DEPC-H2O。
• 在7号管中加入5μL阳性对照（1×10E8拷贝/μL），充分震荡1分钟，生成1×10E7拷贝/μL的标准曲线样品，随后放置于冰上待用。
• 依次进行稀释至得到6个不同稀释度的标准曲线样品，均放置于冰上待用。
• 若不需制作标准曲线，将阳性对照稀释至1×10E5拷贝/μL即可。

3. 试剂配制（试剂准备区）

根据待检样品数量，准备N+2个qPCR管，并向各PCR管中加入所需成分（详细说明请参考我司提供的说明书）。

4. 添加模板（模板添加区）

向qPCR管中加入2μL模板，添加顺序为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品模板、阳性对照，随后离心30秒，立即进行扩增反应。

5. 扩增反应（扩增及产物分析区）

将PCR管置于PCR扩增仪器的相应位置，按照预设程序进行扩增（详见说明书）。

6. 结果分析

在绘制标准曲线时，阳性对照浓度的log值作为横轴，Ct值作为纵轴。当进行样本检测时，根据Ct值判断结果：

• 阳性对照：Ct值<30，有明显指数增长，呈现典型S型曲线。
• 阴性对照：Ct值为38或无Ct值，无明显指数增长及平台期。
• 样本检测结果：Ct值<35表明获取婴儿利什曼虫，结果为阳性；Ct值在35-38范围内需复检，确保结果的可靠性。

运输及保存

尊龙凯时产品需要低温运输，并在-20℃保存，保存期为一年。同时，阳性对照应单独放置，以防污染其他试剂。在生物医疗领域，选择尊龙凯时将为您的研究提供强有力的支持与保障。